當代生理學實驗(二版)

Part 1　概論

實驗1　緒　論Introduction　　　　　　　　　　　　　　

一、目的
　　認識並了解實驗室常用的各種器械及顯微鏡的使用方法。

二、提示
　　生理學是一門生動有趣的科學，能使學生對身體產生的各種反應得到答案。在學習生理學實驗的過程，應秉持著積極研究的精神，以探索其答案，將可從實驗的過程中發現生理學的奧祕。在保育動物的觀念下，每位同學應珍惜每隻動物的犧牲，充分運用動物的器官功能與生理反應。

書寫生理學實驗報告應包括以下幾項大綱：

1.前言（introduction）：書寫內容主要包括此實驗的目的及重要原理。
2.結果（results）：實驗結果可以表格方式整理或繪圖加以說明。
3.討論（discussion）：將結果配合學理加以分析，亦可參考書中所列各項問題加以說明。
4.結論（conclusion）：總結報告各項內容，詞句必須簡明扼要。對於實驗室的各種器械，必須知道其名稱及操作方式，尤其對顯微鏡等貴重儀器，學員必須先了解正確使用方法，才可順利操作實驗及避免損壞。

三、材料

1.有齒鑷子（tissue forceps）
2.無齒鑷子（dressing forceps）
3.組織剪（surgical scissors）
4.擴張器（dilator）
5.滴管（dropper）
6.骨鉗（bone cutting forceps）
7.探針（probe）
8.止血鉗（mosquito hemostatic forceps）
9.解剖刀及刀柄（blade and scalpel handle）
10.微量吸管（micropipet）
11.黃色吸頭（yellow tip）：200 μ　
12.藍色吸頭（blue tip）：1000 μ　
13.叩診鎚（hammer）
14.敲診鎚（hammer）
15.光學顯微鏡（microscope）

四、步驟

(一)器械
部分實驗室器械如下：
1.有齒鑷子：用於動物的皮膚、毛髮及肌肉等組織，可固定而避免滑動。
2.無齒鑷子：用於動物的腦組織及內臟器官，可避免組織受損。
3.組織剪：一端為鈍端可避免組織受損，一端為尖端可用於細小組織。
4.擴胸器：用於打開胸腔及固定。
5.骨鉗：可撥開腦殼。
6.探針：青蛙麻醉用。
7.止血鉗：用於夾閉血管或固定組織，亦可用於裝卸解剖刀。
8.微量吸管：用於吸取微量液體，如配藥時使用。

(二)光學顯微鏡使用方法
1.光學顯微鏡放置於離桌緣至少5公分位置，注意應以雙手拿取，一手握住鏡臂，另一手托住底座以避免震盪。
2.將電源插上並開啟光源。
3.檢查接目鏡及接物鏡是否髒汙，以拭鏡紙擦拭。
4.將載玻片放置於載物台上並夾好，以粗細調節輪調至適當位置。
5.調整兩眼瞳距與接目鏡焦距，兩眼須同時睜開，近視同學的眼鏡戴著或取下皆可。
6.接物鏡主要包括10X、40X及100X三種，使用原則為由低倍至高倍，若觀察組織切片或血球計數時，可先用10X（乘上接目鏡10倍即可放大100倍）的接物鏡，調整粗調節輪到切片影像出現，此時亦可調節光源大小，然後再將接物鏡調至40X（放大400倍），再以細調節輪調至影像清晰為止。
7.在鏡台圓孔正下方有聚光器（condenser），用以聚集及調節光線，而附於聚光器的下方有虹膜光圈（diaphragm），可藉其調節桿來調節光圈開啟的大小，配合光源的量，可決定透過聚光器而打在玻片背面的光線強弱；過亮時常因缺乏明暗對比而使標本模糊不清，此時可將虹膜光圈關小，以利於檢視。
8.觀察時切忌將粗調節輪快速上升或下降，以避免壓碎玻片。
9.若欲使用100X物鏡（放大1000倍）時，需先將接物鏡轉移，滴一滴油在適當位置（以油為中間介質，可使觀察更清晰），再小心的將物鏡旋轉接觸到玻片上。高倍鏡頭與玻片距離很近，調整焦距時，須特別注意避免鏡頭觸及玻片標本，使其破裂。
10.使用油鏡（放大1000倍）時，必須以細調節輪慢慢找尋，若仍無法找到，則應重新換回40X接物鏡，找到目標物後再重複使用高倍油鏡。
11.油鏡使用後，必須以沾有二甲苯的拭鏡紙擦拭數次後，再以乾淨的拭鏡紙重複擦拭，切忌使用酒精。
12.顯微鏡使用後必須轉到10X接物鏡，並將鏡台降到最低，關掉燈源，纏好電線，套上膠套，放入乾燥箱中。

(三)動物固定方法
1.大白鼠（SD rat）：
2.青蛙。

五、結果

1.認識並明瞭各種器械及顯微鏡各部構造之名稱與功能。
2.每人均實際操作一次，發掘問題並與同學及老師討論。

六、討論

1.接物鏡上的10X、40X、100X各代表什麼意義？
2.光學顯微鏡的保養方法有哪些？
3.顯微鏡油鏡使用油的理由與目的為何？使用後如何清理？
4.說明顯微鏡的聚光器及虹膜光圈的功能及使用時機。
5.由此實驗你獲得什麼知識及感想？